【技术干货】PNGase F 系列产品全方位技术解析与精准选型指南
2025/11/26
糖生物学是研究糖类的结构、功能及生物学特性的一门科学，糖类也可称为多糖/聚糖，在自然界中广泛分布。在生物学中糖生物学虽然是一门较小的领域，但是发展迅速，与生物医学、生物技术和基础研究都密切相关。蛋白质组学是对生物系统中蛋白质的系统研究，它拓展了我们对蛋白质表达、修饰、相互作用和功能的认知。但在真核细胞中，大多数蛋白质都经过了翻译后修饰。常见的翻译后修饰（依赖于多糖）对细胞存活至关重要，见图 1。糖基化决定了糖复合物的粘附特性，细胞与细胞和细胞与病原体的接触主要是通过糖与蛋白相互作用完成的，这体现了糖生物学重要性。糖组学是研究多糖在生物系统中表达的一门学科，通过有效的酶学和分析技术将多糖结构与功能关联起来。 图1：N-和 O-糖基化 一、PNGase F PNGase F（肽 - N - 糖苷酶 F）是一种酰胺酶，可特异性切割糖蛋白 / 糖肽中最内侧 N - 乙酰葡糖胺（GlcNAc）与天冬酰胺之间的糖苷键，高效去除高甘露糖型、杂合型及复杂型 N - 连接糖，但无法切割核心含 α1-3 岩藻糖修饰的 N - 糖（常见于植物、昆虫细胞表达蛋白）。 图2：PNGase F 作用位点 一句话讲清PNGase F如何“切糖： PNGase F 通过特异性切割糖蛋白最内侧 N -乙酰葡糖胺与天冬酰胺之间的糖苷键，从而将 N-连接糖链从蛋白质上完整切除。 二、PNGase F 家族核心产品技术参数对比 NEB 公司提供的 PNGase F 系列产品已形成多维度细分体系，按功能效率可分为常规 PNGase F、快速 PNGase F、快速 PNGase F（非还原剂型） 三大类，按生产与缓冲液特性又可细分为天然型、重组型、无甘油型，覆盖从基础研究到治疗性糖蛋白质控的全场景需求。 所有 PNGase F 产品均经过严格质控，包括纯度检测（SDS-PAGE 验证）、杂酶污染检测（荧光标记寡糖法）及批间差控制，确保酶活稳定与实验重复性。其中，重组型产品通过基因工程表达，纯度高（≥95%）且批间差更小（≤5%）；无甘油型产品适配 HPLC、质谱等精密检测，避免甘油对分析结果的干扰；快速型产品则大幅缩短反应时间，满足高通量与过程控制需求。 2.1三大功能型 PNGase F 产品对比 2.2常规 PNGase F 亚型（天然 / 重组 / 无甘油型）对比 2.3产品组分对比 2.4工作流程对比 拥有快速 PNGase F，您可以在几分钟内完成去糖基化反应 快速 PNGase F 让抗体分析更加简单： 一步建立反应，加速去糖基化进程 无偏嗜性地去除所有 N-连接糖 反应时间短、灵敏度高、重复性好 快速直接进入下游层析或者质谱分析 高纯度的重组酶具有纯度高、保质期长和批间差小的特点 图3：标准脱糖化工作流程与快速 PNGase F的比较 三、PNGase F 产品选型逻辑 图4：选型推荐 四、常见问题与注意事项 常见QA 1. 所有 PNGase F 均可用于质谱分析：错误。含甘油型需先去甘油，否则干扰检测，仅无甘油型（P0705S/L、P0709S/L）可直接用于质谱。 2. 快速 PNGase F 适用于所有糖蛋白：错误。快速型仅对抗体及免疫球蛋白融合蛋白的去糖效率有明确保障，其他类型糖蛋白需预实验验证。 3. 天然型 vs 重组型？：基础研究选择天然型，实验需要糖蛋白分析，常规监控，且需溯源的，重组型更适合。 4. 有甘油 vs 无甘油型？：看适配的下游分析技术。甘油是酶制剂常用的稳定剂，但会干扰 HPLC、质谱等精密检测，更适合Western Blot、考马斯亮蓝染色。 4.2 实验操作建议 1. 酶活保护：非变性条件下反应需加入 NP-40（终浓度 0.1%），抵消 SDS 对酶活的抑制；避免反复冻融酶液，建议分装保存。 2. 阳性对照：每次实验需设置阳性对照（如 RNase B#P7817S、胎球蛋白 #P6042S），验证酶活与反应体系有效性。 3. 甘油去除：若误用含甘油型用于质谱，可通过 Zeba 脱盐柱（3kDa 截留）或透析（4℃，12-24h）去除甘油。 产品推荐 以下是部分商品信息和货号，更多资讯请关注商城官网——柏澳集（www.biology-market.com）： # END # 关于康成百澳生物 生命科学领域快速消费品及配套服务的专业供应商，总部位于泰州医药城，上海、广州、南京、成都、苏州、杭州、武汉等地设有分公司及办事处。 产品线涵盖精准医疗、抗体、疫苗、CGT、分子生物学与细胞生物学、常规临床检验、药物筛选、基因组学与蛋白质组学等研究和应用领域，以“技术+产品+服务”的一体化模式服务客户。 版权声明：本文为个人整理文章，内容仅供参考，旨在促进学术交流与信息共享，如有异议或侵权，请联系我们处理。
