技术干货 | 实验室慢病毒浓缩完全指南

2026/01/30

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一、为什么要进行慢病毒浓缩?

提高感染效率

慢病毒原液的滴度通常较低,而感染某些难转染、MOI高的细胞(如原代细胞、干细胞、神经细胞等)时,需要较高滴度的病毒才能实现有效的基因转导。浓缩后的慢病毒可显著提高滴度,增强对靶细胞的感染能力。

减少操作体积

浓缩后的病毒体积大幅减小,便于实验操作和储存;有助于精确控制病毒用量,减少对细胞的额外负担,降低实验误差。

去除杂质和污染物

慢病毒包装过程中可能产生大量杂质。浓缩过程通常伴随纯化步骤,可有效去除大量不必要的成分,提高病毒的纯度和质量,减少杂质对实验结果的干扰。

 

 

二、实验室主流慢病毒浓缩方法对比

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三、超滤管进行慢病毒浓缩的核心优势是什么?

1、操作简便高效,耗时短

无需超速离心机;整个浓缩过程通常在30-60分钟内完成,远快于超速离心。

2、病毒活性与回收率高

温和的离心条件(通常3000-4000×g)避免了超速离心产生的剪切力和高速碰撞,能更好地保护病毒包膜完整性,维持病毒感染活性。

3、实验成本小准入门槛低

相较于慢病毒浓缩试剂盒,超滤管浓缩更具性价比,且无需超速离心机等大型设备。,实验室准入门槛低,适合中小型实验室常规使用。

4、兼容性广,适用场景多

不仅适用于慢病毒浓缩,也能兼容蛋白质、核酸等生物大分子的样品处理。

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图1. 慢病毒包装以及超滤管浓缩流程示例

(注:浓缩病毒的离心力与离心时间仅作参考,实际需根据样品情况调整)

 

 

四、浓缩慢病毒的超滤管如何选择?

 关键选择参数:

1. 截留分子量(MWCO)

根据超滤管品牌提供的选型指南,来选择合适的MWCO。

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图2. Cytiva浓缩离心管病毒或外泌体应用中的截留分子量选择参考**

2. 材质与膜类型

再生纤维素膜:低蛋白吸附,回收率高

PES膜:高通量,耐化学性佳

3. 容量规格

0.5-5 mL:适合少量病毒浓缩

5-20 mL:常规实验规模的病毒浓缩

4. 离心力要求

检查超滤管耐受离心力(通常3000-4000×g)

匹配实验室离心机配置

 

 

五、产品推荐——Cytiva浓缩离心管

 

浓缩离心管的应用范围

  • 蛋白质、核酸、病毒或外泌体的浓缩

  • 脱盐、缓冲液置换

  • PCR产物与引物的分离

  • 细胞裂解液和组织匀浆的澄清

  • 标记反应中游离小分子标记物的去除

 

Cytiva浓缩离心管的特点和优势

加速样品处理

起始样品体积50 μL至60 mL

  • Nanosep系列基于1.5 mL离心管,非常适合少量样品(50-500 μL)的浓缩,不同截留分子量的Nanosep离心管在滤膜位置标记了不同的颜色。

  • Microsep系列外观尺寸接近于15 mL离心管,适合0.5-5 mL样品的浓缩。

  • Macrosep系列外观尺寸接近于50 mL离心管,适合5-20 mL样品的浓缩。

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Nanosep系列

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Microsep系列

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Macrosep系列

 

大幅度地提高样品回收率

  • 高流速,对蛋白质与核酸的非特异性吸附低

  • 死体积设计能有效防止过度离心使样本干掉而造成样本损失

  • 回收率通常超过90%

易于视觉识别

  • 利用不同颜色标记离心管,便于识别产品规格

提供多种膜材满足不同应用

  • 超滤应用:Omega改性聚醚砜膜(MWCO:1 kDa -300 kDa)

  • 微滤应用:Bio-Inert改良尼龙膜、wwPTFE亲水聚四氟yixi膜、Supor聚醚砜膜(0.2 µm,0.45 µm)

 

 

*标称孔径是指电镜显微镜下具体测量的结果

**参考Cytiva官网的Pall™浓缩离心管中文宣传单页

 

 

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