引用超460篇论文的"明星抗体"——ab192890:帮你搞定自噬 !

2026/03/25

 

什么是自噬?

 

自噬是细胞通过双层膜结构的自噬体(Autophagosome)包裹待降解物质,随后与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解内容物并回收利用的过程。这一机制在营养匮乏、 氧化应激、病原体感染等胁迫条件下被激活,既参与正常发育、免疫调控等生理过程,也与神经退行性疾病、肿瘤、代谢综合征等病理进程密切相关。

2016年,日本科学家大隅良典因"发现细胞自噬的机制"获得诺贝尔生理学或医学奖,自此自噬成为生命科学领域最热门的研究方向之一。

(图1)

 

自噬研究的核心:如何精准检测自噬活性?

 

自噬是一个动态多步过程:从自噬体形成、延伸,到与溶酶体融合,最终完成降解。仅仅检测单一分子的表达量,无法准确反映自噬流(Autophagic Flux)的真实水平。而LC3B(Microtubule-associated protein 1 light chain 3 beta)的发现,为解决这一难题提供了关键突破口。

 

LC3B:自噬体的标志物

 

LC3B是LC3蛋白家族中研究最为广泛、也最具代表性的亚型之一,由MAP1LC3B 基因编码。它在细胞自噬过程中发挥关键作用,作为自噬体的结构组分,参与自噬囊泡与自噬体的形成。自噬被激活后,未修饰的LC3B-I会转化为修饰形式的 LC3B-II,因此LC3B-II的积累常被用作判断自噬活性的重要指标。

 

LC3B作为标记物的核心价值

 

1. 定量相关性:LC3-II的表达水平与自噬体的数量呈正相关,通过Western Blot检测LC3-II/I比值,可反映细胞自噬水平的高低。

2. 可视化检测:通过免疫荧光染色,LC3-II会呈现特征性的斑点状聚集(Puncta),可在显微镜下直接观察自噬体的数量和定位。

3. 自噬流评估:结合溶酶体抑制剂(Bafilomycin A1 / Rapamycin / Hydroxychloroquine / Chloroquine)处理,比较抑制剂前后LC3-II的变化,可判断自噬流是否顺畅(即自噬体形成后是否能正常降解)。

图2. ab192890在HAP1细胞(野生型和MAP1LC3B敲除型)中染色LC3B,处理条件为±氯喹(50μM,24小时)

 

为何选择 ab192890?

 

1. Abcam专利重组技术—RabMAb®,确保批次稳定性

ab192890采用Abcam的RabMAb®技术生产,属于重组单克隆抗体。与传统单抗相比,它具有以下不可比拟的优势:

  • 极高的批次间一致性:确保您在不同时间购买的抗体性能保持一致,数据可重复性高 。

  • 长期供应保障:重组技术保证了该抗体的长期稳定供应 。

  • 无动物源性生产:避免动物免疫过程中可能产生的批次间差异。

2.KO 验证,特异性无可挑剔

非特异性背景是抗体的常见痛点。ab192890 经过了 Knockout (KO) 验证:

下图为Western blot伪彩图:ab192890 Anti-LC3B抗体 [EPR18709]以1/2000稀释度进行染色,显示为绿色;小鼠抗α-微管蛋白 [DM1A] (ab7291) 作为上样对照,以1/20000稀释度进行染色,显示为红色。Western blot结果显示,ab192890可特异性结合LC3B蛋白。在处理过的野生型HepG2细胞裂解物中,在16/14 kDa处观察到条带(黄色箭头),而在MAP1LC3B敲除细胞系ab277828(敲除细胞裂解物ab283796)中,该大小处未见信号。

图3.ab192890 检测 Chloroquine诱导的野生型HepG2和LC3B敲除的HepG2细胞中LC3B的表达。

所有泳道:Western blot - Anti-LC3B抗体 [EPR18709] - 自噬体标记物 (ab192890),稀释度为1/1000

泳道1:野生型HepG2未处理对照细胞裂解物,20 µg

泳道2:野生型HepG2经氯喹处理(50 µM,16小时)的细胞裂解物,20 µg

泳道3:MAP1LC3B敲除HepG2未处理对照细胞裂解物,20 µg

泳道4:MAP1LC3B敲除HepG2经氯喹处理(50 µM,16小时)的细胞裂解物,20 µg

泳道5:U-87 MG细胞裂解物,20 µg

泳道6:PC-12细胞裂解物,20 µg

预测条带大小: 15 kDa
观察到的条带大小: 14 kDa、16 kDa

 

 

总结

 

自噬作为维持细胞稳态的核心机制,其研究热度居高不下。然而要精准捕捉这一动态过程,离不开稳定、特异、经得起验证的研究工具。ab192890 凭借 RabMAb® 重组技术带来的超强批次一致性,以及通过MAP1LC3B敲除细胞验证的特异性,在Western Blot与免疫荧光中均展现出优异性能,能为您的实验提供坚实可靠的数据支撑。

 

 

END 

关于康成百澳生物

生命科学领域快速消费品及配套服务的专业供应商,总部位于泰州医药城,上海、广州、南京、重庆、成都、苏州、杭州、武汉、济南等地设有分公司及办事处。

产品线涵盖精准医疗、抗体、疫苗、CGT、分子生物学与细胞生物学、常规临床检验、药物筛选、基因组学与蛋白质组学等研究和应用领域,以“技术+产品+服务”的一体化模式服务客户。

部分图片、字体、文字来源于网络 如有侵权请联系删除